Cách ly exosome： Phương pháp cô lập exosome hiệu quả và chuyên nghiệp

Phương pháp tách exosome: Cách tách exosome từ mẫu máu

Exosome là một loại vi thể nhỏ, có kích thước từ 30 đến 150 nanomet, được tìm thấy trong nhiều loại mẫu sinh học như máu, nước tiểu và dịch não tủy. Exosome chứa nhiều loại protein, RNA và lipid, và được cho là có vai trò quan trọng trong việc truyền tải thông tin giữa các tế bào trong cơ thể. Vì vậy, việc tách exosome từ mẫu máu là rất quan trọng trong nghiên cứu y học và sinh học phân tử.

Các phương pháp tách exosome

Hiện nay, có nhiều phương pháp để tách exosome từ mẫu máu, bao gồm:

• Ultracentrifugation: Phương pháp này sử dụng lực ly tâm để tách exosome từ các thành phần khác trong mẫu máu. Tuy nhiên, phương pháp này có nhược điểm là tốn thời gian và đòi hỏi thiết bị đắt tiền.
• Immunoaffinity capture: Phương pháp này sử dụng khả năng kết hợp giữa các kháng thể và các protein trên bề mặt exosome để tách chúng ra khỏi mẫu máu. Phương pháp này có độ chính xác cao, nhưng đòi hỏi sử dụng các kháng thể đắt tiền.
• Size exclusion chromatography: Phương pháp này sử dụng sự khác biệt về kích thước giữa exosome và các thành phần khác trong mẫu máu để tách chúng ra. Phương pháp này đơn giản và hiệu quả, nhưng có thể bị ảnh hưởng bởi các tạp chất trong mẫu máu.

Phương pháp tách exosome bằng ultracentrifugation

Trong bài viết này, chúng tôi sẽ tập trung vào phương pháp tách exosome bằng ultracentrifugation. Đây là phương pháp phổ biến nhất và được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu exosome.

Để tách exosome bằng ultracentrifugation, ta cần chuẩn bị các vật liệu sau:

• Mẫu máu
• Đĩa lọc 0.22 micromet
• Đĩa lọc 0.8 micromet
• Đĩa lọc 1.2 micromet
• Đĩa lọc 2.0 micromet
• Đĩa lọc 5.0 micromet
• Đĩa lọc 10.0 micromet
• Đĩa lọc 20.0 micromet
• Đĩa lọc 40.0 micromet
• Đĩa lọc 100.0 micromet
• Ultracentrifuge
• Ống lưu trữ exosome

Sau khi chuẩn bị các vật liệu, ta tiến hành các bước sau:

1. Lấy mẫu máu và đưa vào ống lưu trữ exosome.
2. Sử dụng đĩa lọc 0.22 micromet để loại bỏ các tạp chất nhỏ hơn exosome.
3. Sử dụng các đĩa lọc có kích thước lớn hơn để loại bỏ các thành phần khác trong mẫu máu, như protein và tế bào máu.
4. Sử dụng ultracentrifuge để tách exosome ra khỏi các thành phần khác trong mẫu máu. Đây là bước quan trọng nhất trong quá trình tách exosome.
5. Lấy exosome từ ống lưu trữ và sử dụng các phương pháp phân tích để xác định tính chất của chúng.

Kết luận

Exosome isolation là một bước quan trọng trong nghiên cứu y học và sinh học phân tử. Hiện nay, có nhiều phương pháp để tách exosome từ mẫu máu, và phương pháp tách bằng ultracentrifugation là phương pháp phổ biến nhất. Tuy nhiên, các phương pháp khác cũng có ưu điểm riêng và có thể được sử dụng tùy thuộc vào mục đích nghiên cứu.

Từ khoá: exosome isolation, ultracentrifugation, immunoaffinity capture, size exclusion chromatography, mẫu máu